Pesquisa de anticorpos anti-Neospora spp. e anti-herpersvírus equino em cavalos de tração no município de Santa Maria, RS, Brasil / Looking for antibodies anti-Neospora spp. and anti-equine herpersvirus in carter horses in Santa Maria, Brazil

O presente estudo teve como objetivo investigar a ocorrência de anticorpos contra Neospora spp. e o herpesvírus equino (EHV) em soros de cavalos de tração de Santa Maria, RS, Brasil. Os soros sanguineos provenientes de 91 animais do projeto de extensão da Universidade Federal de Santa Maria "Programa de Ação Social Amigos do Carroceiro" (PASAC) foram colhidos no período de março de 2006 a maio de 2008 e submetidos ao teste de imunofluorescência indireta para detecção de anticorpos anti-Neospora spp. e à técnica de soro neutralização para anticorpos anti-EHV. Constatou-se que 15,4 por cento (14/91) das amostras foram reagentes para o Neospora spp. e não se verificou a presença da infecção pelo herpesvírus equino. Sugere-se a circulação do coccídeo na população equina estudada. Salienta-se a necessidade de estudos adicionais sobre o potencial risco zoonótico e a importância sanitária desse protozoário nos cavalos de tração.

This study aimed to investigate the prevalence of antibodies against Neospora spp and equine herpesvirus (EHV) among carter horses in Santa Maria, RS, Brazil. Serum samples from 91 horses, involved in the extension project "Programa de Ação Social Amigo do Carroceiro" at Universidade Federal de Santa Maria, were collected from March of 2006 to May of 2008. Immunofluorescence assay was used to detect Neospora spp. and virus neutralization assay to EHV. This research showed 15.4 percent (14/91) samples were positive to Neospora spp. and no antibodies against EHV were detected. These results suggest the presence of Neospora spp. in carter horses of Santa Maria. Additional studies are needed to determine the zoonotic potential risk and the sanitary importance this protozoan in the population analyzed.

In vitro evaluation of Clostridium septicum alpha toxoid / Avaliação in vitro de toxoide alfa de Clostridium septicum

Aiming to investigate in vitro alternatives, a test for neutralizing antibody detection using cell culture was developed. This test was more sensitive than previous animal models, allowing for detection of substantially lower alpha toxin and anti-alpha toxin titers. Titers observed during in vivo and in vitro seroneutralization had a correlation of 99.12 percent, indicating that cell culture is a viable alternative in the evaluation of vaccine potency, screening of vaccinal seeds, and Clostridium septicum alpha toxin titration.

Padronizou-se um teste para detecção de anticorpos neutralizantes in vitro, em cultura de células. O modelo in vitro mostrou-se mais sensível que os testes com animais, permitindo a detecção de títulos de toxina e antitoxina alfa mais baixos. Os títulos observados na soroneutralização in vivo e in vitro, apresentaram correlação de 99,12 por cento, demonstrando ser a cultura de células uma alternativa viável na avaliação da potência de vacinas, triagem de sementes vacinais e titulação de toxina alfa de Clostridium septicum.

Herpes Virus Bovino tipo 1 (BoHV-1) como posible causade encefalitis en bovinos de la región del Magdalena MedioColombiano. Estudio serológico y análisis epidemiológico / Herpes Vírus Bovino tipo 1 (BoHV-1) como uma possível causa de encefalite em bovinosda região do Magdalena Medio Colombiano. Estudo sorológico e análise epidemiológico / Bovine Herpes Virus type 1 (BoHV-1) as a possible cause of encephalitis in cattle of the Colombian Magdalena Medio Region. Serological study and epidemiological analysis

Los herpesvirus bovino tipo 1 y 5 (BoHV-1 y BoHV-5), causan enfermedades que producen importantespérdidas económicas en ganaderías de todo el mundo. Ambos afectan el sistema nervioso de los bovinos,aunque ha sido el BoHV-5 más asociado a este tipo de patogénesis. Teniendo en cuenta la muerte de animalescon sintomas nerviosos y negativos a rabia en la zona de estudio, el objetivo de esta investigación se centró enla detección de reactores positivos por seroneutralización al herpesvirus bovino, recolectando 518 muestrasde sangre en bovinos sin vacuna contra este agente, en los municipios de Caparrapi (Cundinamarca),Cimitarra (Santander), Honda (Tolima) y Victoria (Caldas). Además, información epidemiológica útilpara discutir sobre enfermedad neurológica fue recolectada mediante fuentes de información primariasy secundarias. Para el análisis de los datos se utilizó la prueba chi-cuadrado identificando la relaciónentre la evidencia de infección viral y las variables registradas. Los resultados revelaron que 286 casosfueron positivos a infección con herpesvirus, correspondiendo a una prevalencia de 55.5%, sin embargo,no hubo relación estadística (p<0.05) entre la presencia de anticuerpos y las variables que se analizaron.En conclusión, algunos de los casos de enfermedad neurológica en bovinos del área pudieron deberse a lainfección con los herpesvirus y se discute sobre la presencia de ellos en el medio, los planes de diagnósticoy control, así como las pérdidas económicas que puedan causar en ganaderías de la zona.

The bovine Herpesvirus type 1 and type 5 (BoHV-1 and BoHV-5), causing diseases and significanteconomic losses in farms of worldwide. Both affect the nervous system of cattle, although BoHV-5 hasbeen the most associated with this type of pathogenesis. Given the death of animals with nervous symptomsand negative diagnoses for rabies virus in the area of study, this research focused on the detection ofpositive reactors to bovine herpes virus serum neutralization. We collected 518 blood samples from animalswithout Herpesvirus vaccine, in the municipalities of Caparrapi, Cimitarra, Honda and Victoria, in theMiddle Magdalena River Region. In addition, epidemiological information useful to discuss neurologicaldisease was collected through primary and secondary sources. For the analysis of data was used chi-squaretest by identification of relationship between evidence of viral infection and the variables recorded. Theresults revealed that 286 cases were positive for Herpesvirus infection, corresponding to a prevalence of55.5%, however, there was no statistical relationship (p < 0.05) between the presence of antibodies and thevariables analyzed. In conclusion, some cases of neurological disease in cattle in this region could be dueto infection with herpes viruses. We discussed about the presence of BoHV-1 and BoHV-5 in the ambient,diagnosis and monitoring plans, as well as economic losses, which may cause in herds in this area.

Os herpesvirus bovino tipo 1 e 5 (BoHV-1 e BoHV-5), causam doenças que produzem importantesperdidas econômicas no gado de todo o mundo. Juntos afetam o sistema nervoso dos bovinos, embora temsido o BoHV-5 mais associado a este tipo de patogênese. Tinindo em conta a morte de animais com sintomasnervosos e negativos à doença da raiva na zona do estudo, objetivo-se esta pesquisa na detecção de reatorespositivos pela soro neutralização ao herpesvirus bovino, coletando 518 amostras de sangue em bovinossem vacina contra este agente, nos municípios de Caparrapi, Cimitarra, Honda e Victoria, zona conhecidacomo Magdalena Médio Colombiano. Alem disso, informação epidemiológica útil para discutir sobre adoença neurológica foi coletada mediante fontes de informação primarias e secundarias. Para o análisedos dados utilizou-se o teste Ji quadrado, identificando a relação entre a evidencia de infecção viral e asvariáveis registradas. Os resultados revelaram que 286 casos foram positivos à infecção com herpesvirus,correspondendo a uma prevalência de 55,5%, embora, não apresentou relação estadística (p<0,05) entrea presencia de anticorpos e as variáveis que se analisaram. Em conclusão, alguns dos casos de doençaneurológica em bovinos da área poderiam ter sido causados pela infecção com os herpesvirus e se discutesobre a presencia no médio, os planos de diagnóstico e controle, assim como, as perdas econômicas naregião.

Padronização da titulação da toxina épsilon de Clostridium perfringens tipo D em linhagem contínua de células como alternativa ao bioensaio animal / Standardization of the titration of the epsilon toxin of Clostridium perfringens type D in cell line as an alternative to animal bioassay

Enterotoxemia, também chamada de doença do rim pulposo, doença que acomete os ruminantes domésticos, é causada pela ação da toxina épsilon produzida pelo Clostridium perfringens tipo D, um anaeróbio comumente isolado do solo e das fezes de animais sadios. O método tradicional de diagnóstico baseia-se na detecção e classificação dessa exotoxina no conteúdo intestinal por meio da soroneutralização em camundongos. Com isso, o objetivo deste estudo foi padronizar um teste para detecção e titulação dessa toxina in vitro e compará-lo ao fenômeno in vivo. Para isso, uma partida de toxina épsilon de Clostridium perfringens tipo D foi titulada em camundongos e em várias linhagens contínuas de células. Após a determinação da linhagem celular mais sensível, realizaram-se ensaios de titulação in vitro de diluições de uma partida de toxina, comparando-os com os títulos in vivo conhecidos. Os resultados foram agrupados, e foi desenvolvida a equação matemática que melhor adaptou-se aos intervalos trabalhados. A linhagem MDCK, além de mais sensível, demonstrou que o fenômeno observado in vitro pode ser expresso por meio da equação matemática que apresenta uma correlação de 98,33 por cento, com a dose mínima mortal determinada in vivo. Portanto, a linhagem MDCK permite titular a toxina épsilon de C. perfringens tipo D de forma específica e sensível, além de ser uma técnica prática, rápida e que dispensa o uso de animais.

Enterotoxemia (also called pulpy kidney disease) is an enteric disease, that affect ruminants, produced by epsilon toxin from Clostridium perfringens type D, an anaerobic commonly isolated from soil and feces of healthy animals. The diagnostic is based on detection of this exotoxin in the intestinal content by soroneutralization in mice. Therefore, this study aimed to standardize a test for detection and titration of the toxin in vitro, and compare it with the phenomenon in vivo. A volume of epsilon toxin was titrated in mice and in some cell lines. After concluding the most sensitive cell line, were held in vitro titrations of dilutions from a toxin wich one had in vivo titer known. The results were grouped and a mathematical equation was developed. MDCK cell line showed that the phenomenon observed in vitro can be expressed by a mathematical equation wich shows a correlation of 98.33 percent with a minimum lethal dose determined in vivo. Therefore, the soroneutralization using MDCK allows a specific, sensitive, practical, fast, and doesn't requere use of animal titration of epsilon toxin.

Imunogenicidade de isolados de herpesvírus bovino 5 como candidatos à vacina / Immunogenicity of bovine herpesvirus 5 isolates as vaccine candidates

O herpesvírus bovino 5 (BoHV-5) é o agente da menigoencefalite herpética bovina. A doença neurológica, associada à infecção pelo BoHV-5, apresenta altas taxas de letalidade em bovinos jovens e está disseminada no Brasil. A prevenção das perdas causadas pela infecção pelo herpesvírus está baseada, principalmente, na imunização dos animais. Nesse sentido, foi delineada uma comparação entre isolados de BoHV-5, buscando selecionar o isolado mais antigênico para a formulação de vacinas. As formulações inativadas foram produzidas com os isolados ISO9898292, SV507, SV163, 1807 e EVI145 e administradas a cinco grupos de 10 ovelhas cada, que receberam duas doses vacinais por via intramuscular com intervalo de 21 dias. Foram realizadas coletas de sangue para análise de presença de anticorpos por soroneutralização e acompanhamento dos animais até o 63° dia após a primo-vacinação. Foram observados dois picos na curva de anticorpos, o primeiro no dia 14, após a vacinação, quando os títulos médios de anticorpos variaram entre 23,1 e 138,6. O segundo pico foi observado 14 dias após a revacinação, quando os títulos médios variaram entre 301,3 e 1017,5. No 42° dia após a revacinação, foi observada variação de título entre 82,4 e 305,9. A diferença entre as médias de títulos de anticorpos de cada grupo de animais sugere uma menor antigenicidade do isolado ISO9898292 em relação aos demais, demonstrando uma possível variação antigênica entre os isolados. Todos os isolados, com exceção do ISO9898292, mostraram-se imunogênicos para a indução de anticorpos.

Herpesvirus bovine 5 (BoHV-5) is the agent of bovine herpetic menigoencephalitis. The neurological disease associated with the infection is highly lethal in young cattle and it is widespread in Brazil. Control of the clinical signs caused by herpesviruses is based mainly on the immunization of cattle. A comparative study was performed among Brazilian BoHV-5 isolates to select the more antigenic virus. Inactivated vaccines were formulated using isolates ISO9898292, SV507, SV163, 1807 and EVI145 and administered to five groups of 10 sheep, each animal receiving two intramuscular doses with a 21 days interval. Blood collection for serology by virusneutralization were performed until the 63rd day after the first vaccination, two peaks in the curve of antibodies were observed, the first on day 14, ranged from 23.l to 138.6. The second peak was observed 14 days after the booster, and ranged from 301.3 to 1017.5. In the 42nd day after the booster, it was observed a titer variation from 82.4 to 305.9. The differences among antibody titers of each group of suggests a lower antigenicity of isolate ISO9898292 in comparison with the others, demonstrating a possible antigenic variation among the isolates. Thus, all isolates, with exception of ISO9898292, were immunogenic for the induction of neutralizing antibodies.

Efeito do congelamento sobre a imunogenicidade da vacina contra a raiva produzida em tecido cerebral de camundongo / Effect of freezing on immunogenicity of the rabies vaccine produced in suckling mouse brain

The immune humoral response induced by the rabies vaccine produced in suckling mouse brain was studied in 23 dogs. The mouse neutralization test (MNT) was used to evaluate the level of rabies antibodies. Ten dogs received vaccine stored at 2 to 8 degrees C, showing the following results: 30 days after vaccination, six samples (60%) responded to the MNT; 180 days after vaccination, 4 samples (40%); and 360 days after vaccination, only one sample (10%). The remaining 13 dogs received previously frozen vaccine and 30 days after vaccination, only two samples (l5.4%) responded to the MNT. No titers were detected 180 and 360 days after vaccination. Statistical analysis of each variable used Tuckey analysis of variance, which showed statistically significant differences between the two groups.

A resposta imune humoral induzida pela vacina contra a raiva produzida em cérebros de camundongos recém-nascidos foi estudada em 23 cães e o teste de soroneutralização em camundongos foi usado para avaliação dos níveis de anticorpos rábicos. Um grupo com 10 animais recebeu vacina conservada de 2 a 8oC e apresentou os seguintes resultados: após 30 dias da vacinação 6 (60%) amostras responderam ao teste; após 180 dias 4 (40%) e após 360 dias apenas 1 (10%). O outro grupo com 13 cães recebeu vacina previamente congelada e somente 2 (15,4%) amostras no dia 30 apresentaram resposta satisfatória; os demais períodos (180 e 360) após a vacinação, não foi encontrado título. A análise estatística dos dados referentes a cada uma das variáveis consideradas no estudo foi efetuada segundo a técnica de análise de variância seguida por Tuckey e indicaram diferenças estatisticamente significativas entre os grupos.

Herpes bovino tipo 1 (BHV 1): I. Sorologia de rebanhos com problemas reprodutivos / Bovine herpesvirus type 1 (BHV-1): I. Sorologic survey in herds with reproductive problems

A presença de anticorpos neutralizantes contra o BHV-1, foi pesquisada pelo teste de soroneutralização (SN) em 2.341 soros, dos quais 747 apresentaram resultado positivo, representando 31,9 por cento de bovinos infectados pelo BHV-1. Os soros foram enviados de 112 propriedades da Região Sul, sendo na maioria rebanhos de gado de corte com problemas reprodutivos. Foram detectados bovinos sorologicamente positivos em 80 propriedades, representando 71,3 por cento, demonstrando a expressiva disseminação do vírus nos rebanhos desta região.

Serum antibodies against BHV-1 were studied, by the serum neutralization test, in cattle from Southem Brazil. Samples were collected from 2341 cattie from 112 farms that had reprodution problems. Positive results were obtained in 747 (31.9) cattie from 80 (71.31 percent) farms, given evidence of the expressivo vírus dissemination in cattie from this region.

Isolamento do poliovírus a partir do líquido cefalorraquidiano de crianças com poliomielite / Isolation of poliovirus from the cerebrospinal fluid of children with poliomyelitis

É apresentado o resultado da pesquisa de poliovírus em casos de meningite concomitante com paralisia ou paresia. Foram estudados materiais de 193 crianças com isolamento do poliovírus do tipo I, de 172; do tipo II, de um caso e, do tipo III, de 10 casos. Verificou-se a ocorrência de maior número de casos nos dois primeiros anos de vida, com sensível diminuição em crianças de maior idade. Foram isoladas 16 amostras do poliovírus de líquido cefalorraquidiano (AU).